Sensibilité ex vivo de Plasmodium falciparum à la Chloroquine et prévalence des mutations pfcrt-76T et pfmdr1-86Y à Bobo-Dioulasso

Abstract

Le paludisme demeure une cause majeure de morbidité et de mortalité au Burkina Faso. Le traitement du paludisme simple est  actuellement basé essentiellement sur l’utilisation de l'artéméther-luméfantrine, la dihydro-artémisinine et l’artésunatepyronaridine. La  pharmacovigilance des antipaludiques disponibles demeure une grande priorité. Dans cette étude, nous avons évalué la sensibilité ex  vivo de P. falciparum à la Chloroquine et la prévalence des mutations pfcrt-76T et pfmdr1-86Y à Bobo-Dioulasso. Pour mesurer la sensibilité de Plasmodium falciparum à la chloroquine, nous avons collecté du sang veineux de 92 sujets atteints de paludisme dans les  centres de santé de Sakaby et Hamdallaye entre juillet et décembre 2022. Nous avons calculé les valeurs CI₅₀ suivant un test standard  d'inhibition de la croissance de 72 heures. L'ADN du parasite extrait au Chelex100 a été génotypé pour déterminer la prévalence des  mutations pfcrt K76T et pfmdr1 N86Y. Au total 71/92 (77%) échantillons ont été mis en culture avec succès. La CI50 médiane de 21 nM  avec 5 échantillons ayant des valeurs de CI₅₀ supérieures ou égales à 100nM, valeur seuil de la chloroquinorésistance de P. falciparum. La  plupart des échantillons présentaient des génotypes de type sauvage avec 87% pour pfcrt-K76 et 96 % pour pfmdr1-N86. Contrairement à pfmdr1-86Y, la présence de la mutation pfcrt-76T était fortement associée à une diminution de la sensibilité à la  chloroquine (p= 0,001 et OR = 0,03). Nos résultats indiquent d'excellentes sensibilités des isolats de P.falciparum à la CQ avec une faible  prévalence des mutations pfcrt-76T et pfmdr1-86Y associés à la chloroquinorésistance. 

English title: Ex vivo susceptibility of Plasmodium falciparum to Chloroquine and prevalence of pfcrt-76T and pfmdr1-86Y mutations in BoboDioulasso.

Malaria remains a major cause of morbidity and mortality in Burkina Faso. Current treatment of uncomplicated malaria is based  essentially on artemether/lumefantrine, dihydro-artemisinin and artesunate-pyronaridine. Monitoring the effectiveness of available  antimalarial drugs remains a high priority. In this study, we assessed ex vivo susceptibility of Plasmodium falciparum to Chloroquine and  the prevalence of pfcr76T and pfmdr1-86Y mutations in Bobo Dioulasso. We sampled venous blood from 92 malaria patients attending  the Sakaby and Hamdallaye health centers between July and December 2022. IC₅₀ values were calculated using a standard 72-hour  growth inhibition test. Parasite DNA extracted by the Chelex100 method and amplified using nested PCR followed by enzymatic digestion  to determine the prevalence of pfcrtK76T and pfmdr1N86Y mutations. Overall, 71/92 (77%) samples were successfully grown. The median  IC₅₀ was 21nM (9 -29) with 5 samples (7.04%) having IC₅₀ values greater than or equal to 100nM, the value considered as  threshold for P. falciparum resistance to chloroquine. The majority of samples showed wildtype genotypes, with 87% for pfcrt-K76 and  96% for pfmdr1-N86. Unlike pfmdr1- 86Y, the presence of pfcrt-76T mutation was highly associated with reduced sensitivity to  chloroquine ( p= 0.001 and OR = 0.03). Our findings suggest excellent susceptibility of Plasmodium falciparum isolates from Bobo- Dioulasso to CQ, with low prevalence of pfcrt-76T and pfmdr1-86Y mutations associated with chloroquine resistance.