Polymerase Chain Reaction To Determine Frequency Of Pyrimethamine (Daraprim) - Resistant Plasmodium falciparum In Volta And Greater Accra Regions Of Ghana

Abstract

Treatment of malaria is being hampered by the emergence of drug resistant strains of malaria parasites. In this study, mutation specific polymerase chain reaction assays using 3\'-mismatched oligonucleotide primers which annealed to the wild or mutated parasites\' gene encoding dihydrofolate reductase-thymidylate synthase (DHFR-TS) were used to survey P. falciparum strains in two southern regions of Ghana (Volta and Greater Accra regions). Mutations were identified directly from blood samples obtained from patients
attending out patient departments in hospitals. A DNA amplification product of 337 base pairs was obtained when reaction products were analysed by electrophoresis. Of 162 smear positive samples collected, 13 (8.0%) contained the Asn-108 codon AAC that confers pyrimethamine resistance, 139 (85.8%) samples contained only the wild-type Ser-108 codon
AGC. Out of the 13 pyrimethamine resistant cases, 10 were found in samples obtained from the Volta Region while the rest (3) were from Korle-Bu Teaching Hospital in the Greater Accra Region. No PCR product was found in 10 (6.2%) of 162 samples. After second (nested) PCR, only one sample showed amplified product. Contamination was negligible. PCR amplification of the DHFR-TS could be used to determine frequency of pyrimethamine resistant P. falciparum strains in malaria blood.
Plasmodium falciparum résistant dans les régions de Volta et de Greater Accra du Ghana. Le traitement du paludisme est en cours d\' être gêné par l\'émergence de souches de parasites de la malaria résistantes au
médicament. Dans cette étude les essais de réaction en chaîne par polymérase (RCP) de mutation spécifique utilisant les primers oligonucléotide de 3\'-mal assortis qui recuisait le gène de parasite muté ou naturel le synthase thymidylate-dihydrofolate réductase (STDHFR)
encodant étaient utilisés pour enquêter sur les souches de P. falciparum dans deux régions au sud du Ghana (les régions de Volta et de Greater Accra). Les mutations étaient identifiées directement dans les prélèvement de sang obtenus de malades qui visitent
les hôpitaux pour les services de consultation externe. Un produit d\'amplification d\'ADN de 337 paire de base était obtenu quand les produits de réactions étaient analysées par électrophorèse. De 162 frottis positifs prélevés, 13 (8.0%) contenait Asn-108 Codon ACC
qui confère la résistance pyriméthamine, 139 (85.8%) prélèvements contenait seulement le type-sauvage Ser- 108 Codon AGC.
Ghana Journal of Science Vol. 47 2007: pp. 11-16