Optimisation des conditions d’etablissement de suspensions cellulaires embryogenes a partir de cals d’apex caulinaire de mil (Pennisetum glaucum (L.) R.)

Abstract

L’isolement de protoplastes en vue de la régénération de plantes transgéniques chez les monocotylédones dépend de la qualité des suspensions cellulaires embryogènes. Ce travail a pour objectif d’établir les conditions optimales d’établissement de suspensions cellulaires embryogènes régénérables en plantes pour permettre une transformation génétique ultérieure. Ce travail réalisé, pour la première fois, sur des variétés de Pennisetum glaucum de Côte d’Ivoire, a révélé les facteurs qui influent sur l’établissement et la croissance des suspensions cellulaires embryogènes à partir de cals d’apex caulinaires. En effet, l’établissement de suspensions cellulaires embryogènes a été obtenu au bout de 8 semaines, lorsque la première filtration a été faite après 2 semaines et que les amas de cals ont été broyés à chaque filtration. En début de culture, lorsque le volume du milieu de culture a été faible (30 ml), la croissance de la suspension cellulaire embryogène a été d’autant meilleure que l’intervalle de temps entre les subcultures a été plus court (3 jours). Inversement, un intervalle de temps plus long (6 jours) entre les subcultures s’est montré meilleur pour de grands volumes de milieu de culture (60 ml). La croissance de la suspension cellulaire embryogène a été comparable sur les deux milieux de culture utilisés (MS et N6).

Mots clés : In vitro, suspension cellulaire, cal embryogène, Pennisetum glaucum, Côte d’Ivoire.

EFFICIENT CONDITIONS FOR ESTABLISHING EMBRYOGENIC CELL SUSPENSIONS DERIVED FROM STEMAPEX CALLUS IN PEARL MILLET (Pennisetum glaucum (L.) R.)

Isolation of protoplasts for the regeneration of transgenic monocotyledonous plants depends on the quality of embryogenic cell suspensions. This work aims to establish the optimal conditions for the establishment of regenerable embryogenic cell suspensions of plants to enable further genetic transformation. This work released for the first time, on varieties of Pennisetum glaucum from Côte d’Ivoire revealed the factors that influence the establishment (the date of the first filtration and the grinding of the callus) and the growth (the mass of the initial heap of callus, the volume of the culture medium and the time interval between subcultures) of embryogenic cell suspensions derived from stem apex callus. It appears that the establishment of embryogenic cell suspension is obtained after 8 weeks when the first filtration takes place after two weeks and heaps of callus are ground at each filtration. During the first days of culture, when the volume of the culture medium is low (30 ml), the growth of embryogenic cell suspension is better if the time interval between the subcultures is shorter (3 days). Conversely, a longer period of time (6 days) between subcultures is needed for larger volumes of culture medium (60 ml). The growth of embryogenic cell suspension is similar on both culture media used (MS and N6).

Keywords : Tissue culture, embryogenic cell suspension, callus, Pennisetum glaucum, Côte d’Ivoire.